六玄网132432应用检测部参考中国农业行业标准（NY/T 1372-2007），利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪经实践检测可提供饲料中三聚氰胺的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、植物性蛋白饲料、宠物饲料（干粮、罐头）中三聚氰胺的测定，仅供广大用户参考。

以下是饲料中三聚氰胺的测定的详细检测方法。

• 1   仪器与试剂

• 1.1  仪器

• LC-10Tvp高效液相色谱仪

• Vertex 色谱柱　150mm×4.6mm×5μm

• 超声波清洗器

• 涡旋混合器

• 离心机：10，000r/min

• 氮吹仪，可控温至60℃

• 固相萃取装置

• 高速匀质器

• 索氏提取器
  

• 震荡摇床

• 1.2 试剂

• 甲醇，色谱纯。
  

• 乙腈，色谱纯。
  

• 氨水。
  

• 混合型阳离子交换固相萃取柱。
  

• 氨水甲醇溶液。
  

• 乙酸铅溶液。
  

• 滤膜，0.45μm，有机相。
  

• 甲醇溶液。
  

• 庚烷磺酸钠。
  

• 柠檬酸。
  

• 三聚氰胺标准品：纯度≥99%。

• 2 试样溶液的制备

• 2.1 提取
  

• 配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、植物性蛋白饲料、宠物饲料（干粮）中三聚氰胺的提取。称取试样适量，准确加入三氯乙酸溶液，再加入乙酸铅溶液。摇匀，超声提取。静置，取上层提取液转入离心管，在10,000r/min离心机上离心。
  宠物饲料（罐头）中三聚氰胺的提取。称取试样适量，加入乙醚，摇床上120r/min振荡，弃去乙醚，再加入乙醚，摇床上120r/min振荡，弃去乙醚，其余步骤同上。

• 2.2  净化
  

• 分别用甲醇，水活化混合型阳离子交换固相萃取柱，准确移取离心液分次上柱，控制过柱速度在1mL/min以内。再用水和甲醇洗涤混合型阳离子交换固相萃取柱，抽近干后用氨水甲醇溶液洗脱。洗脱液50℃氮气吹干，准确加入甲醇溶液，涡旋振荡1min，过0.45μm滤膜，上机测定。

• 3 色谱条件

• 色谱柱：Vertex 色谱柱　150mm×4.6mm×5μm；
  

• 流动相：庚烷磺酸钠+柠檬酸+乙腈；
  

• 流速：1.0mL/min;
  

• 温度：室温；
  

• 检测波长：240nm；
  

• 进样量：20μL。

• 4 三聚氰胺标准品色谱图